SN 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 SN/T0212.3-93 出口禽肉中三氯二甲吡啶酚 残留量检验方法 丙酰化-气相色谱法 Method for determination of clopidol residues in poultry meat for export -Propionylation- gas chromatography 1993-06-04发布 1993-08-01实施 中华人民共和国国家进出口商品检验局：发布 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口禽肉中二氯二甲吡啶酚 残留量检验方法 SN/T0212.3-93 丙酰化-气相色谱法 Method for determination of clopidol -residues in poultry meat for export —Propionylation-gas chromatography 1主题内容与适用范围 本标准规定了出口禽肉中二氯二甲吡啶酚残留量检验的抽样、制样和气相色谱测定方法。 本标准适用于出口冻鸡中二氯二甲吡啶酚残留量的检验。 2抽样和制样 2.1检验批 以不超过2500件商品为～检验批。 同一检验批的商品应具有相同特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。 2.2＇抽样数量 批量(件) 最低抽样数（件） 1~25 1. 26~100 5 101~250 10 251~500 15 501~1000 17 1001~2500 20 2.3抽样方法 按2.2规定的抽样件数随机抽取，逐件开启。每件至少取一袋作为原始样品，原始样品总量不少于 2kg，放入清洁容器内，加封后，标明标记，及时送交实验室。 2.4试样制备 从每袋原始样品中取出部分有代表性样品，将可食部分放入高速组织揭碎机中擒碎均匀，充分混 匀，用四分法缩分出不少于.1000g试样。装入清洁的容器内，加封后，标明标记。 2.5：试样保存 将试样于一18℃冷冻保存。 注：在抽样及制样过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 ：3测定方法 3.1方法提要 中华人民共和国国家进出口商品检验局1993-06-04批准： 1993-08-0.1实施 .1 SN/T0212.3—93 用甲醇提取肉样中二氯二甲吡啶酚，经氧化铝柱净化，除去脂肪和色素。以丙酸酐反应，转化成相应 的酯。用内径为0.53mm毛细管柱气相色谱法（电子俘获检测器）测定，外标法定量。 3.2试剂和材料 3.2.1无水硫酸钠：分析纯，经650C灼烧4h。置于干燥器内备用。 3.2.2甲醇：分析纯，经全玻璃装置重蒸馅，收集64~65℃馏分。 3.2.3氧化铝：中性层析用，粒度100～200筛目，在300℃灼烧3h，放入干燥器中备用。 3.2.4.氧化铝：中性层析用，粒度100～200筛目，在.800灼烧3h，并在130烘箱中烘烤1h后，放 入干燥器中备用。 3.2.5丙酸酐：分析纯。经全玻璃装置重蒸馏。 3.2.6吡啶：色谱纯。 3.2.7·助滤剂：Celite545，使用前用甲醇洗涤两次；每次没泡半小时。 3.2.8四硼酸钠：优级纯，干燥无水，在配制溶液前，应将此试剂在热溶液中重结晶一次。 3.2.9四硼酸钠溶液：0.1mol/L。取38.0g四硼酸钠（3.2.8），溶宇i000mL蒸馏水中。 相色谱仪内，该正已烷在色谱图上应无干扰被测组分的杂峰。 3.2.11正已烷：分析纯。重蒸馏；收集6769℃馏分。取500mL正己烷，通过填充13cm高度中性氧 化铝（3.2.4)层析柱(20mm(id）×200mm），流速为2mL/min。 3.2.12丙酮：分析纯。 3.2.13 3二氟二甲吡啶酚标准品：纯度≥99%。， 中，以甲醇准确定容至100mL，摇匀，作为标准储备溶液。根据需要再配成适用浓度的标准工作溶液。 3.3仪器和设备 3.3.1气相色谱仪：配备电子俘获检测器和热式毛细管柱头进样器。 3.3.2微量注射器：10μL,50μL。 3.3.3高速组织捣碎机。 3.3.4·康式振荡器。 3.3.5旋转蒸发器。 3.3.6恒温水浴锅。 3.3.7净化柱：20mm(id）×200mm玻璃柱。柱底部填约0.5cm高脱脂棉（脱脂棉经丙酮-正已烷（2 +3)抽取3h），装入16g氧化铝（3.2.3）轻轻蔽打装实。用.前经40mL甲醇淋洗。 3.3.8带螺旋盖试管：15mL（13mm×130mm），具有聚四氟乙烯内衬的塑料螺旋盖。 3:3.9离心机：转速3000r/min。 3.3.10氮气：纯氮（≥99.99%）。 3.4测定步骤、 3.4.1：提取.** 取经绞碎混匀的试样约20g（精确到0.01g）于250mL具塞锥型瓶中，加入50mL甲醇和3g助 滤剂于振荡器上提取30min。在平底漏斗内铺上2g助滤剂，抽滤提取液。用40mL甲醇分3次洗涤锥 型瓶并将洗涤液移入平底漏斗。滤液定量转移到100mL容量瓶中，用少量甲醇多次洗涤滤瓶，洗液收 集于同一容量瓶中，用甲醇定容。 3.4.2·净化 用移液管准确吸取上述滤液20mL，移入氧化铝柱（3.3.7)中，以2mL/min流速流出。用40mL甲 醇洗柱内壁。滤液及洗液接收于100.mL烧杯中，用，50C水浴的旋转蒸发器或在50℃水浴中以氮气流 将溶剂蒸干。用2～3mL甲醇溶解残渣，并定量转入15mL带螺旋盖试管（3.3.8)，用氮气流将甲醇浓 : :2 SN/T.0212.393 缩至约0.5mL。 3.4.3酯化 在上述试管中依次准确加入：4hL0:1mo1/L·四硼酸钠溶液；1mL正已烷；25L吡啶和50L丙 酸酐。加塞，振摇1min。在3000r/min下离心5min，将上层正已烷移入另一干净具塞试管中，经加少 量无水硫酸钠脱水后，供气相色谱分析。 3.4.4标准物酯化 取适用浓度的标准工作溶液，用氮气将体积浓缩至0.5mL，按3.4.3进行酯化反应。 3.4.5测定 3.4.5.1测定色谱条件： 毛细管色谱柱BP10键合相，0.53mm(id)×30m，熔融石英制。 a. b. 柱温：165℃。 c. 进样口温度：250℃。 d. 检测器温度：250℃； 载气、尾吹气：氮气(≥99.99%）柱流量3mL/min；尾吹气流量33mL/min。 e. f. 进样方式：柱头进样方式。 3.4.5.2色谱测定：分别准确注入1L经酯化后的样品溶液及标准工作溶液于气相色谱仪中，按 3.4.5.1条件进行色谱分析。响应值均应在仪器检测的线性范围之内。 二氯二甲吡啶酚丙酯的保留时间约为12min。 3.5空白试验：除不称取样品外，按上述测定步骤进行。 3.6结果计算和表述 用色谱数据处理机或按下式计算样品中二氯二甲吡啶酚残留含量： X=h.c.v h,-m 式中：X—样品中二氯二甲吡啶酚含量，mg/kg； h 样液中二氯二甲吡啶酚丙酯峰高，mm； 标准工作溶液中二氟二甲吡啶酚丙酯峰高，mm； 标准工作溶液中二氯二甲吡啶酚浓度，ug/mL； V- 最终样液的体积，mL； 最终样液所代表的样品重量，g。 m- 注：空白值应从计算结果中扣除。 4测定低限、回收率 4.1测定低限 本方法测定低限为0.005mg/kg。 4.2回收率 回收率的实验数据：二氯二甲吡啶酚添加浓度在0.005～0.050mg/kg范围内，回收率为74%~ 119%。 附加说明： 本标准由中华人民共和国国家进出口商品检验局提出。 本标准由中华人民共和国天津进出口商品检验局负责起草。 3 SN/T0212.393 本标准主要起草人高晓敏、许泓、穆乃强。 参考文献： AOAC-Journal of Official Methods of Analysis, Vol. 6,2,1984. Professional Standard of the People's Republic of China forImport.andExport CommodityInspection SN/T0212.3—93 Methodfordetermination ofclopidol residues'in poultry meat for export -Propionylation-gas chromatogrphy 1.Scopeand field of application This standard specifies the method of sampling, sample preparation and determination by gas chromatography of clopidol residues in poultry meat for export. This standard is applicable to the determination of clopidol residues in broilers for export. 2 .Sampling and sample preparation 2.1Inspectionlot The quantity of an inspection lot should not be more than 2 500 packages. The characteristics of the cargo within the same inspection lot, such as packing,mark, origin, specification and grade, should be the same. 2.2Quantityof sampletaken