ICS 67.040 QB 分类号：X60 备案号：37976-2013 中华人民共和国轻工行业标 QB/T4358-2012 营养强化剂5’一腺苷酸 Nutritional fortifiers Adenosine-5'-monophosphate 2013-03-01实施 2012-11-07 发布 中华人民共和国工业和信息化部 发布 QB/T 43582012 前 言 本标准按照GB/T1.1－2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工联合会提出。 本标准由全国乳制品标准化技术委员会归口。 本标准由南通秋之友生物科技有限公司、黑龙江省乳品工业技术开发中心、山东凯盛新材料股份有 限公司负责起草。 本标准主要起草人：曹静、孙常雁、邱蔚然、王芸、李文娟、杜卫群、李云龙。 - QB/T4358-2012 营养强化剂5’-腺苷酸 1范围 本标准规定了营养强化剂5”-腺苷酸的要求、试验方法、检验规则和标志、包装、运输、贮存。 本标准适用于以酵母核糖核酸（RNA）为原料，经5'-磷酸二酯酶降解而制得的5"-腺苷酸。 规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 603 化学试剂实验方法中所用制剂及制品的制备 GB 4789.2 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定 GB 4789.3 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数 平板计数法 GB 4789.4 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验 GB/T 4789.5 食品卫生微生物学检验志贺氏菌检验 GB 4789.10 食品安全国家标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验 GB 4789.15 食品安全国家标准 食品微生物学检验 霉菌和酵母计数 GB4789.40 食品安全国家标准 食品微生物学检验 阪崎肠杆菌检验 GB 5009.3 食品安全国家标准 食品中水分的测定 第一法 直接干燥法 GB5009.12 食品安全国家标准 食品中铅的测定 GB/T5009.11 食品中砷的测定 第一法原子荧光法 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T6040红外光谱分析方法通则 GB7718预包装食品标签通用标准 JF1070定量包装商品净含量计量检验规则 国家质量监督检验检疫总局令[2010]第12 国家质量监督检验检疫总局令[2005]第75号 化学名称、英文缩写、结构式、分子式、相对分子质量 3 化学名称：5'-腺苷酸（5'-单磷酸腺苷，5 结构式： NH2 =O HO- OH HO HO 分子式：CioHi4NsO,P 相对分子质量（无水）：347.22（按2007年国际相对原子质量） QB/T4358-2012 4要求 4.1J 原料要求 符合相关规定要求 4.2 感官指标 产品为白色结晶或结晶性粉末，无可见异物， 无味，微溶于水。 4.3理化指标 理化指标应符合表1规定 表1 理化指标 目 指 标 与标准品红 光谱 鉴别 含量（C1oH14NOP，以 千基计） 98.0~ 102.0 干燥失重/% 6.0 透光率(5%溶液)/% 95 pH（5%水溶液） 2.0~ 86 紫外吸光度比值 0.20 280/A260 砷（以As计）/mg/kg） 1.0 铅（以Pb让（mg/kg） ≤ 1.0 4.4 微生物指标 微生物指标应符合表2的规定 表2微生物指标 标 菌落总数/（CFU/ 1000 大肠菌群/（MPN < 3 霉菌和酵母菌 (CFU/g) 50 致病菌（沙 门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、阪崎肠杆菌） 不应检出 4.5净含量及其检验 应符合国家质量监督检验检疫总局令[2005]第75号的规定，按JJF F1070规定进行检验。 5·试验方法 本试验 方法中所用 用的水 应符合GB/T6682分析实验室用水 规格和试验方 法三级以上的水。 本试验方 法中所用的试剂，均指分析纯（AR若有特殊要求应另作明确规定。 本试验所用 夜在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液 5.1感官指标 5.1.1取20g样品置于清洁、干燥的白瓷盘中， 在白然光线下，观察其色泽、可见异物，嗅其味。 5.1.2称取研成细粉的样品1g，置于1000mL、（25±2）℃水中，每隔5min强力振摇30s，观察 30min内的溶解情况，应全部溶解 2 QB/T4358-2012 5.2鉴别 按GB/T6040 2002规定方法执行，红外图谱参见附录A 5.3含量 5.3.1仪器 5. 3. 1. 1 高效液相色谱仪 （配有紫外检测器和柱 恒温系统， 检测波长254nm 5. 3. 1. 2 流动相真空抽滤脱气装置及0.2μm、0.45μm微孔膜。 色谱柱：HypersilODS25μm（4.6mm×250mm）或同等分析效果的色谱柱。 5. 3. 1. 3 5. 3.1. 4 分析天平： 感量为0 mg. 5.3.1.5 微量进样器：50μL。 55.33.2.,试剂和溶液 1ol/L，pH5.5）：称取1.93g乙酸铵溶于1.0L水中，用2mol/L的冰醋 5.3. 5.5，采用0.45μm微 放孔膜进行流动相过滤，超声波脱气装置脱气30min。 2. 水：二次蒸馅水或超 超纯水。 5. 3. 2p3 5-腺苷酸标准品：S IGMA试剂，含量不小于98% 5. 3. 2. 4 5-腺苷酸标准溶液 示准试剂5-腺苷酸100.0 用超纯水溶解并加入2mol/L氢 氧化钠溶液1~2滴助溶，定容至50mL容量瓶中， 混合均匀后，准确吸取1.0mL，用乙酸铵溶液定容 到50mL容量瓶中，摇匀，制成每毫升约含40μg的溶液，进样前采用0.2um微孔膜过滤。 5.3.3分析步骤 5.3.3.1样品溶液的制备 称取样品100.0mg，按5'-腺苷酸标准溶液的配制方法配制 5.3.3.2样品测定 开机器预热，并装上色谱柱，调柱温为（25±0.5）℃（柱温箱的精确度为±0.1℃）， 色谱柱按要 求进行处理。正式测试前，将所用流亏 相乙酸铵溶液（5.3.2.1）， 流速0.8mL/min，输入系统半小时以上， 待基线稳定后即可进样，进样量为20L。 将5'-腺苷酸标准溶液和制备好的样品分别进样。根据标准品的保留时间，确定样品5 腺苷酸的色 谱峰。根据样品的峰面积，以外标法计算5-腺苷酸的百分含量 5.3.3.3结果计算 样品中的 腺苷酸的含量按式（1）计算，数值以%表示。 x100% (1) A,xmx(1-r) 式中： 分食量（以干物质十 % Xi 样品中 15-腺苷酸的百面积 ), 单 A; 样品中5-腺苷酸的峰 位为克（g) 标准5 腺苷酸的 ms r 标准品5 腺苷酸的干燥失重 As 示准品中5-腺苷酸的峰面积； m 样品5-腺苷酸的质量，单位为克（g） 样品5-腺苷酸的干燥失重，%。 ri 5.3.4允许差 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值，不应超过0.5%。 3 QB/T4358-2012 5.4干燥失重 按GB5009.3第一法直接干燥法规定的方法测定。 5.5透光率 5.5.1仪器 紫外分光光度计。 5.5.2分析步骤 称取样品1.0g，溶于20mL0.1mol/L mol/L氢氧化 5.5.3允许误差 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值，不应超过0.5%。 5.6 pH 5.6.1仪器 酸度计、超声波清洗器。 5.6.2分析步骤 称取样品1.0g，加水20mL溶解，并在超声波清洗器中超声助溶，然后用酸度计测定清液的pH。 5.6.3允许误差 同一样品两次测定值之差不应超过0.2。 5.7紫外吸光度的比值 5.7.1仪器 紫外分光光度计。 5.7.2试剂和溶液 盐酸溶液（0.01mo 5.7.3分析步骤 按5.3.2.3中配制方法配制样品溶液，吸取样品溶液1.0mL，用盐酸溶液（5.7.2）定容至100mL， 混匀，然后以盐酸溶液作空白，于紫外分光光度计分别测定250nm、260nm、280nm处的吸光度。 5.7.4计算 5.7.4.1 吸光度250nm和260nm处的比值按式（2）计算： A250 (2) A260 式中： XI 250nm和260nm处紫外吸光度比值； A250 -250nm处样品的紫外吸光度； A260 -260nm处样品的紫外吸光度。 5.7.4.2 吸光度280nm和260nm处的比值按式（3）计算： X, = (3) A260 式中： -280mm和260nm处紫外吸光度比值； A280 -280nm处样品的紫外吸光度； -260nm处样品的紫外吸光度。 A260 5.7.5允许差 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值，不应超过0.02。 4 QB/T4358-2012 5.8砷 按GB/T5009.11规定的方法测定，试剂硝酸、盐酸为优级纯。 5.9铅 按GB5009.12规定的方法测定，试剂硝酸、盐酸为优级纯。 5.10菌落总数 按GB4789.2规定的方法检验。 5.11大肠菌群 按GB4789.3规定的方法检验。 5.12 霉菌和酵母菌 按GB4789.15规定的方法检验。 5.13致病菌 按GB4789.4、GB/T4789.5、GB4789.10、GB4789.40规定的方法检验。 6 检验规则 6.1组批 在同一生产线、连续生产、质量均匀的产品为一批。 6.2取样 样本的抽取见表3。 表3抽样表 批量范围/（桶/包） 样本大小/（桶/包） ≤25 3 26~150 8 151~499 13 ≥500 20 将