QB ICS 67.040 分类号：X60 备案号：37975-2013 中华人民共和国轻工行业标准 QB/T 4357-2012 营养强化剂5’-胞苷酸 Nutritional fortifiers Cytidine-5'-monophosphate 2012-11-07发布 2013-03-01实施 中华人民共和国工业和信息化部 发布 QB/T43572012 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工联合会提出。 本标准由全国乳制品标准化技术委员会归口。 本标准由南通秋之友生物科技有限公司、黑龙江省乳品工业技术开发中心、山东凯盛新材料股份有 限公司负责起草。 本标准主要起草人：邱蔚然、王芸、曹静、孙常雁、李文娟、杜卫群、李云龙。 QB/T4357-2012 营养强化剂5”-胞苷酸 1范围 本标准规定了营养强化剂5'-胞苷酸的要求、试验方法、检验规则和标志、包装、运输、贮存。 本标准适用于以酵母核糖核酸（RNA）为原料，经5'-磷酸二酯酶降解而制得的5'-胞苷酸。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T603化学试剂实验方法中所用制剂及制品的制备 GB4789.2 食品安全国家标准食品微生物学检验 菌落总数测定 GB 4789.3 食品安全国家标准食品微生物学检验 大肠菌群计数 平板计数法 GB 4789.4 食品安全国家标准食品微生物学检验 沙门氏菌检验 GB/T 4789.5 食品卫生微生物学检验志贺氏菌检验 GB 4789.10 食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验 GB 4789.15 食品安全国家标准 食品微生物学检验 霉菌和酵母计数 GB4789.40 食品安全国家标准 食品微生物学检验 阪崎肠杆菌检验 GB5009.3 食品安全国家标准食品中水分的测定 第一法直接干燥法 GB5009.12 食品安全国家标准食品中铅的测定 GB/T5009.11食品中砷的测定第一法原子荧光法 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T6040红外光谱分析方法通则 GB7718预包装食品标签通用标准 JF1070定量包装商品净含量计量检验规则 国家质量监督检验检疫总局令[2010]第127号食品添加剂生产监督管理规定 国家质量监督检验检疫总局令[2005]第75号定量包装商品计量监督管理办法 3化学名称、英文缩写、结构式、分子式、相对分子质量 化学名称：5'-胞苷酸（5'-单磷酸胞苷，5'-CMP） 结构式： NH2 9 HO-P-O OH OH OH 分子式：C,Hi4NOgP 相对分子质量（无水）：323.20（按2007年国际相对原子质量） QB/T4357-2012 4要求 原料要求 4.1 符合柏关规定要求 4.2感官指标 产品为白色结晶或结晶性粉末， ，无可见异物，无味， 微溶于水 4.3理化指标 理化指标应符合表1规定。 表1 理化指标 项 指 目 鉴别 与标准品红外光谱一致 含量（C,Hi4N;OsP，以干基计）% 98.p~102 5.0 干燥失重% p5.0 透光率(5%溶液)/% pH（5%水溶液） 2.0~3.5 Az50/A26t 0.4~0.49 紫外吸光度比值 A280/A260 2.03~217 砷（以A$）/（mg/kg） ≤ 1.0 铅（以Pb计）/（mg/kg） 1.0 4.4微生物指标 微生物指标应符合表2的规定。 表2微生物指标 项 指 标 ≤ 1000 菌落总数/（CFU/g） 3 大肠菌群/（MPN/g） > 霉菌和酵母菌/（CFU/g） 50 致病菌（沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、阪崎肠杆菌） 不应检出 4.5 净含量及其检验 应符合国家质量监督检验检疫总局令[2005]第75号的规定，按JF1070规定进行检验 5 试验坊法 本试验方法中所的水，应符合GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法三级以上的水。 本试验方法中所用的试剂，均指分析纯（AR）。若有特殊要求应另作明确规定/ 本试验所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。 5.1感官指标 5.1.1取20g样品置天清洁、干燥的白瓷盘中，在自然光线下，观察其色泽、可见异物，嗅其味。 5.1.2称取研成细粉的样品lg；置于1000mL、（25土2）℃水中，每隔5min强力振摇30s，观察 30min内的溶解情况，应全部溶解。 2 QB/T4357-2012 5.2鉴别 按GB/T/6040-2002规定方法执行，红外图谱参见附录A。 5.3含量 5.3.1 仪器 5.3.1.1 高效液根色谱仪（配有紫外检测器和柱恒温系统，检测波长254nm） 5.3.1. 2 流动相真空抽滤脱气装置及0.2μm、0.45μm微孔膜。 5.3.1. 3 色谱柱：HypersilbDS25μp(4.6mm250mm)或同等分析效果的色谱柱。 分析天平：感量为0.1mg。 5.3.1.4 5.3.1. 5 微量进样器：50μ 5.3. 2 试剂和溶液 5.3.2. 1 乙酸铵溶液（0.025mol/L，pH5.5）：称取1.93g乙酸铵溶于1.0L水中，用2mol/L的冰醋 I为5.5，采用0.45μh微孔膜进行流动相过滤，超声波脱气装置脱气30min。 酸调pH 5.3. 2.2 水：二次蒸馏水或超纯水。 5.3.2.3 5'-胞苷酸标准品：SIGMA试剂，含量不小于98%。 5.3.2.4 胞苷酸标准溶液：精密称取棕准试剂5-胞苷酸100.0mg，用超纯水溶解并加入2mol/L氢氧 化钠溶液 1～2滴助溶，定容至50mL容量瓶中！混合均匀后，准确吸取1.0mL，用本酸铵溶液定容到 50mL容量瓶中，摇勾，制成每毫升约含40.ug的溶液，进样前采用0.2μm微孔膜过滤。 5.3. 3 分析步骤 5.3. 3.1 样品溶液的制备 称取样品100.0mg，按5-胞首酸标准溶液的配制方法配制。 5.3.3.2样品测定 开机器预热，并装上色谱柱，调柱温为（25士0.5）℃（柱温箱的精确度为士01℃），对色谱柱按要 求进行处理。正式测试前，将所用流动相乙酸铵溶液（5.3.2.1），流速l0.8mL/min，输入系统半小时以上， 待基线稳定后即可进样，进样量为20μL。 将5'-胞苷酸标准溶液和制备好的样品分别进样。根据标准品的保留时间确定样品5'-胞苷酸的色 谱峰。根据样品的峰面积，以外标法计算5"-胞苷酸的百分含量。 5.3.3.3结果计算 样品中的胞苷酸的含量按式（1）计算数值以%表示 A, ×m,×(1-r) ×100% (1) A, ×mx(1-r) 式中: Xi 样品中5-胞苷酸的百分含量（以干物质计），%； A; 样品中5-胞春酸的峰面积； 标准又-胞昏酸的质量，单位为克（g)； ms 标准品5-胞苷酸的干燥失重，%； r 标准品中5~胞苷酸的峰面积； As 样品5'-胞苷酸的质量，单位为克（g）； m 样品文-胞苷酸的干燥失重，%。 ri 5.3.4 允许差 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值，不应超过0.5%。 3