(19)国家知识产权局 (12)实用新型专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202123448770.7 (22)申请日 2021.12.31 (73)专利权人 康码 （上海） 生物科技有限公司 地址 201321 上海市浦东 新区芙蓉花路1 18 弄12号楼 (72)发明人 郭敏　李克绪　徐丽琼　于雪　 (51)Int.Cl. C12M 1/40(2006.01) C12M 1/10(2006.01) C12M 1/00(2006.01) (54)实用新型名称 一种可提高体 外蛋白表达效率的装置 (57)摘要 本实用新型的可提高体外蛋白合成表达效 率的装置， 包括可盛放体外无细胞蛋白合成体系 的反应液的反应容器， 放置于一运动台上， 跟随 运动； 所述反应容器内设有固定于底 面上的一组 隔片， 所述隔片不完全隔断所述底面， 且所述隔 片的前表面与底面倾斜设置。 通过设置所述隔 片， 增加了反应容器中反应液的可接触面积。 在 体外表达蛋白质时， 通过运动台帮助反应液在运 动中尽量摊开至全部的可接触面积， 降低了在蛋 白合成反应中反应液的厚度。 实验证明， 在几乎 不影响反应速度的情况下， 本实用新型的可提高 体外蛋白合成表达效率的装置， 可一次性处理更 大容量的反应液， 故大大提高了体外合成蛋白质 的量， 从而大大提高了蛋白质体外合成的效率， 适应于工业应用。 权利要求书1页 说明书6页 附图3页 CN 217324113 U 2022.08.30 CN 217324113 U 1.一种可提高体外蛋白表达效率的装置， 其特征在于， 包括可盛放体外无细胞蛋白合 成体系的反应液的反应容器和一 运动台， 所述反应容器放置 于所述运动台上， 跟随运动； 所述反应容器内设有固定于底面上的一组隔片， 所述隔片不完全隔断所述底面， 且所 述隔片的前表面与底面 倾斜设置。 2.根据权利要求1所述的装置， 其特 征在于， 所述隔片与所述底面平 滑过渡连接 。 3.根据权利要求1所述的装置， 其特征在于， 所述底面与 所述反应容器的侧壁平滑过渡 连接。 4.根据权利要求1或2或3所述的装置， 其特征在于， 所述运动台为一旋转台， 所述旋转 台的旋转轴从水平面倾斜向上设置； 所述反应容器为底面近似圆形 的反应罐， 通过底面中 心垂直固定 于所述旋转轴上跟随旋转。 5.根据权利要求4所述的装置， 其特征在于， 所述反应罐可拆卸地固定于所述旋转轴 上。 6.根据权利要求4所述的装置， 其特征在于， 所述隔片绕所述底面中心轴 对称分散 固定 于所述底面上。 7.根据权利要求4所述的装置， 其特征在于， 所述隔片为近似三角叶片形状： 所述隔片 的第一边沿所述反应罐的侧壁倾斜向上固定， 所述隔片的第二边从接近所述底面中心的位 置， 沿大致径向、 固定 于所述底面上， 所述隔片的第三 边为自由边。 8.根据权利要求7所述的装置， 其特征在于， 所述第一边和/或所述第二边为流线型走 向。 9.根据权利要求4所述的装置， 其特征在于， 所述隔片的前表面与旋转方向之间的夹角 为钝角。 10.根据权利要求1或2或3所述的装置， 其特征在于， 所述运动台为摇床， 所述一组隔片 在所述底面上 大致平行设置， 且与摇动方向大致垂直。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 217324113 U 2一种可提高体外蛋白表达效率的装 置 技术领域 [0001]本实用新型属于分子生物实验技术领域， 具体涉及一种可提高体外蛋白合成表达 效率的装置 。 背景技术 [0002]蛋白质是细胞中的重要分子， 几乎参与了细胞所有功能的执行。 蛋白质的序列和 结构不同， 决定了其功能的不同。 蛋白质的合成与生产， 目前还是依赖于细胞器进行， 包括 从DNA模板到mRNA的基因转录(transcript)过程， 和将mRNA上的遗传信息 （三碱基对） 翻译 (translation)成对应的氨基酸后连接成蛋白质的过程。 这两步可以由保留生物活性的完 整细胞进行合成 （蛋白质的体内合成） ， 也可以在裂解后的细胞裂解液 （lysate)中合成 （蛋 白质的体外 /无细胞合成， 也 叫做蛋白质合成的细胞体外转录 /翻译， IVT T） 。 [0003]具体地， 基因转录是指以DNA的一条链为模板， 在DNA依赖的RNA聚合酶催化作用 下， 以4 种NTP( ATP、 CTP、 GTP和UTP)为原料， 按照碱基互补配对原则， 合成一条RNA的过程。 对于有些RNA  病毒， RNA  也可以指导合成RNA。 翻译成氨基酸再连接成蛋白质， 具体是以 mRNA为模板， tRNA为运载工具， 在有关酶、 辅助因子的作用下将活化的氨基酸在核糖体(亦 称核蛋白体)上装配为蛋白质多肽链的过程。 [0004]其中， 蛋白质合成的细胞体外转录/翻译， 指以外源目的mRNA或D NA为模板， 通过人 工控制补加蛋白质合成所需的底物和转录、 翻译相关蛋白因子等物质， 以实现目的蛋白质 的合成。 因为蛋白质的体外合成， 无需进行质粒构建、 转化、 细胞培养、 细胞收集和破碎步 骤， 所以是一种相对快速、 省时、 便捷的蛋白质表达方式， 故近年 来， 发展很快。 [0005]但是， 目前的IVTT技术， 基本 都是基于小型的培养容器进行的， 例如实验室常见的 96孔板， 48孔板， 24孔板， 12孔板， 或是6cm培养皿， 15cm培养皿等。 使用较小的培养容器， 执 行IVTT反应， 效果相对比较稳定。 例如， 用来表达EGFP （Enhanced  Green Fluorescent   Protein， 增强绿色荧光蛋白， 一种常用的定量蛋白， 很容易通过检测荧光值而测出EGFP蛋 白的量） 时， 产物的荧光值， 可以稳定在3000RFU （relative  fluorescence  units, 相对荧 光单位） 以上， 甚至当lysate的活性高时， EGFP荧 光值还可以达 到10000RFU以上。 [0006]但是当蛋白质体外合成应用于工业生产时， 就需要一次对较大体积的反应液执行 IVTT反应， 以增加一次合 成蛋白质的量。 此时， 再使用实验室级别的小体积容器， (几百微升 至几毫升)， 就非常不合适。 因为每次灌注反应液、 添加反应物， 都需要把控精度， 非常耗费 时间。 且反应后的清理工作也很麻烦。 可是， 在生产实践 中， 人们又发现， 当IVTT反应液体积 较大， 而不得不使用三角烧瓶或者烧杯等大容量的反应容器， 进 行蛋白质体外合成时， 蛋白 表达量一般又都会低于小容量的对照组 （所述对照组使用96孔板、 48孔板、 24孔板等微孔板 作为反应容器） 。 [0007]所以在蛋白质体外合成的工业应用中， 就需要寻找一种合适的容器， 适用于大体 积的IVTT反应， 并且蛋白表达效率至少与微 孔板可比拟。 [0008]因此， 现有技 术有待于进一 步改进和提高。说　明　书 1/6 页 3 CN 217324113 U 3