(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210559760.0 (22)申请日 2022.05.23 (71)申请人 南京大学 地址 210023 江苏省南京市栖霞区仙林大 道163号 (72)发明人 陈江宁　崔芷莹　肖琳　黄振　 张峻峰　 (74)专利代理 机构 江苏斐多律师事务所 323 32 专利代理师 张佳妮 (51)Int.Cl. A61K 47/46(2006.01) A61K 31/704(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 HL-60细胞来源的细胞外囊泡在作为靶向肿 瘤的载药系统中的应用 (57)摘要 本发明公开了HL ‑60细胞来源的细胞外囊泡 在作为靶向肿瘤的载药系统中的应用。 LPS和 IFN‑γ处理后中性粒细胞内， 获得的细胞外囊泡 中相关促炎因子的表达水平显著上调， 特别是中 性粒细胞活化的重要指标ICAM ‑1在mRNA和蛋白 质表达水平均显著上升。 高表达ICAM ‑1的中性粒 细胞来源EVs更容易被高表达整合素的肿瘤细胞 黏附捕获。 利用中性粒细胞来源的EVs负载Dox制 备载药EVs， 有效提高体内载药EVs被肿瘤细胞的 摄取效率及其对杀伤肿瘤细胞的能力。 权利要求书1页 说明书4页 附图4页 CN 115089721 A 2022.09.23 CN 115089721 A 1.HL‑60细胞来源的细胞外囊泡在作为靶向肿瘤的载 药系统中的应用。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于： 所述的细胞外囊泡为用ATRA将HL ‑60细胞 诱导分化为中性粒细胞， 再使用LP S和IFN‑γ刺激中性粒细胞 得到。 3.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于： 所述细胞外囊泡作为载药系统时负载的药 物为具有医疗用途的诊断或治疗活性的药物。 4.根据权利要求3所述的应用， 其特征在于： 所述药物为顺铂、 紫杉醇、 吉非他滨、 长春 瑞滨、 培美曲塞中的一种或多种。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115089721 A 2HL‑60细胞来源的细胞外囊泡在作 为靶向肿瘤的载药系统中 的应用 技术领域 [0001]本发明涉及HL ‑60细胞来源的细胞外囊泡在作为靶向肿瘤的载 药系统中的应用。 背景技术 [0002]化学合成药物、 基因药物， 尤其是天然药物或中药活性成分因其溶解性差、 稳定性 低和副作用大等诸多问题严重限制了其在临床上的应用。 使用有机或无机材料作为合成载 体的药物递送系统虽然能够提高药物的溶解度和生物利用度， 但是不能有效靶向病灶部 位， 甚至会被机体的免疫系统视为外源性毒物而排出体外， 无法发挥作用。 [0003]细胞外囊泡(Extracellular  vesicle， EVs)是由细胞产生的纳米级大小的膜结 构， 被认为是介导细胞间通讯的重要方式， 参与了机体内多种生理反应过程。 EVs由于其生 物内源性和低免疫原 性， 可避免其在体内被快速清除， 亦不会引起机体免疫反应。 中性粒细 胞具有高趋化性等特性， 但是其来源的EVs是否能继承中性粒细胞的高趋化性等特征并不 清楚。 发明内容 [0004]本发明的目的是提供HL ‑60细胞来源的细胞外囊泡在作为靶向肿瘤的载药系统中 的应用。 [0005]优选的， 所述的细胞外囊泡为用全反式维甲酸(A ll‑trans retinoic acid， ATRA) 将 HL‑60细胞诱导分化为中性粒细胞， 再使用LP S和IFN‑γ刺激中性粒细胞 得到。 [0006]优选的， 所述细胞外囊泡作为载药系统时负载的药物为具有医疗用途的诊断或治 疗活性的药物。 [0007]优选的， 所述药物为顺铂、 紫杉醇、 吉非他滨、 长春瑞滨、 培美曲塞中的一种或多 种。 [0008]有益效果： 用全反式维 甲酸(All ‑trans retinoic  acid， ATRA)将HL ‑60细胞诱导 分化为中性粒细胞， 再用LPS和IFN ‑γ处理后中性粒细胞内， 获得的细胞外囊泡中相关促炎 因子的表达水平显著上调， 特别是中性粒细胞活化的重要指标细胞粘附分子1 (Intercellular adhesi on molecule 1， ICAM‑1)在mRNA和蛋白质表达水平均显著上升 。 [0009]高表达ICAM ‑1的中性粒细胞来源EVs更容易被高表达整合素的肿瘤细胞黏附捕 获。 利用中性粒细胞来源的EVs负载Dox制备载药EVs， 有效提高体内载药EVs被肿瘤细胞的 摄取效率及其对杀伤肿瘤 细胞的能力。 附图说明 [0010]图1、 HL‑60细胞来源细胞外囊泡的透射电子 显微镜分析图。 [0011]图2、 HL‑60细胞来源细胞外囊泡的纳米颗粒跟踪分析技 术(NTA)分析图。 [0012]图3、 体外流式检测肿瘤 细胞摄取 药物效率。说　明　书 1/4 页 3 CN 115089721 A 3